丙肝疫苗的研究现状:蛋白疫苗

丙肝疫苗的研究现状:蛋白疫苗

　　1 肽疫苗 抗原之所以能诱导特异的体液及细胞免疫反应，是由于它在机体细胞中被分解为多肽后与MHC-Ⅱ类或MHC I 类分子结合，以复合物的形式激活了Th细胞，诱生了特异性抗体及CTL[3]。HCV中的某些T细胞表位对病毒的清除十分重要，若能得到这些多肽，使其在体内或体外直接与MHC I类或MHC-Ⅱ类分子结合，则所得到的复合物将能有效地刺激机体产生保护性免疫应答而避免了抗原递呈的步骤。基于上述假设，人们构建了一系列HCV的疫苗多肽，或使之与MHC分子结合成复合物，并从中筛选出了一些对研制HCV疫苗具有重要意义的HCV抗原多肽。现今绝大部分工作都在确定具有免疫原性的肽而不是测试最有希望的肽疫苗。在肽疫苗研究中，一个经典的方法是用HCV感染患者的血清来筛选噬菌体表达的肽文库，然后选择出与患者血清特异反应的肽段。用HCV感染的患者血清来筛选在噬菌体文库中表达的数目巨大的HVR 1的所有肽段，可以选择出既有抗原性又有免疫原性的肽段作为那些HVR 1发生变异的数目巨大的变异体的类似物。 　　2 包膜蛋白疫苗 HCV包膜El／E2糖蛋白是HCV的表面蛋白，因而最先被用作诱导中和抗体的候选疫苗靶抗原。黑猩猩试验发现，只有哺乳动物细胞重组表达的E2蛋白或者El／E2异二聚体蛋白免疫能抵抗同株HCV攻击，而用昆虫细胞、酵母和大肠杆菌表达的E2蛋白不起保护作用。由于HCV高度变异的特点，这种方法显然还不足以诱导广泛保护性的中和抗体。然而选择合适的免疫佐剂，对慢性HCV感染者接种重组El／E2蛋白也许可通过增强感染者的细胞免疫应答而促进病毒清除。Leroux-Roels等[4]用HCV H 77株E2区合成肽免疫兔，产生了抗同源性合成肽的高活性抗体。将抗体与等体积含有64个CID 50的H 77株中和后再分别注射2只黑猩猩。研究表明，H 77株至少有19种不同来源病毒株同时存在，E2中的HVR 1具有关键的抗体中和表位，从该区产生的合成肽能激发中和抗体产生并能保护黑猩猩对同源性HCV的攻击，但对HCV基因有变异的突变体没有中和作用。一些研究显示，E2中抗HVR 1与中和HCV感染有关，有人从急性肝炎患者分离的H 77株，用其HVR1区合成的21个多肽免疫家兔，用ELISA法证实该免疫血清能防止H 77株感染HPB Ma细胞，但不能阻断对H 77株的突变株H 90株的感染，该结果表明，抗HVR 1抗体的中和作用具有高度特异性。Sällberg等[5]用多种E1和E2重组蛋白与人T细胞淋巴瘤细胞孵育，结果只有哺乳细胞表达的E2重组蛋白能与人T细胞淋巴瘤细胞结合，并发现E2免疫的兔血清能中和E2对靶细胞的结合作用，此种抗体叫作中和结合抗体，对HCV感染有一定的防护作用。
　　尽管HCV的蛋白类疫苗目前取得了一些进展，但是还是处于一个早期阶段。许多策略也证实对小鼠能诱导出强烈的长时间的T细胞介导的免疫反应，对灵长类也取得了一些进展。但由于HCV具有多个基因型及血清型，膜蛋白区同源性小，加之基因突变率高，容易形成没有逃逸病毒株，缺乏具有交叉免疫保护效应的中和抗体，这些诸多因素给HCV蛋白类疫苗研究带来了极大困难。